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手性柱的保存方式直接影響其使用壽命與拆分性能,尤其 Daicel 不同類型手性柱(如多糖鍵合型 IC、蛋白質(zhì)鍵合型 AGP、冠醚型 CR (+))因固定相結構差異,保存溶劑選擇需精準匹配。本文針對這三類熱門型號,梳理保存核心要點與溶劑選擇邏輯,助力延長柱效。
一、CHIRALPAK® IC 手性柱:多糖鍵合型的 “烷烴 - 醇體系” 保存
IC 手性柱作為多糖衍生物鍵合型手性柱,固定相為硅膠表面共價鍵合纖維素 - 三 (3,5 - 二氯苯基氨基甲酸酯),需重點避免固定相脫落與溶劑兼容問題:
常規(guī)保存溶劑:出廠保存溶劑為正己烷 / 異丙醇(90:10 v/v),適用于正相模式使用后的保存 —— 用該溶劑以 0.5ml/min 流速沖洗 30 分鐘,可去除殘留流動相與添加劑,維持鍵合相穩(wěn)定。
反相模式后特殊處理:若 IC 手性柱用于反相體系(如乙腈 / 水相),保存前需先用水 / 乙腈(60:40 v/v) 沖洗 1 小時去除鹽殘留,再換用正己烷 / 異丙醇(90:10)平衡,避免水相殘留導致固定相溶脹。
禁忌:不可用純丙酮、氯仿等強極性溶劑保存,會破壞鍵合結構。
二、CHIRALPAK® AGP 手性柱:蛋白質(zhì)鍵合型的 “水 - 異丙醇體系” 保存
AGP 手性柱為硅膠表面共價鍵合 α1 - 酸性糖蛋白,蛋白質(zhì)固定相易受溫度、鹽濃度影響,保存需兼顧活性與防污染:
標準保存溶劑:出廠推薦水 / 異丙醇(85:15 v/v),無論正相或反相模式使用后,均需先用水 / 異丙醇(90:10) 沖洗去除鹽與添加劑,再換用 85:15 體系保存 —— 異丙醇可抑制微生物滋生,保護蛋白質(zhì)活性。
溫度配合:短期保存(<1 周)可室溫(<30℃)放置,長期保存(>1 周)需4℃冷藏,避免蛋白質(zhì)變性;且保存前需確保無鹽殘留,否則鹽析出會堵塞柱床。
維護細節(jié):若柱內(nèi)吸附疏水性雜質(zhì),可反接用水 / 異丙醇(75:25) 低流速(0.3ml/min)沖洗過夜,再換保存溶劑平衡。
三、CROWNPAK® CR (+) 手性柱:冠醚型的 “水 - 甲醇體系” 保存
CR (+) 手性柱固定相為硅膠表面涂敷 (S)-18 - 冠 - 6 醚,依賴冠醚環(huán)與質(zhì)子化銨離子的結合作用,保存需規(guī)避鉀鹽與強有機相:
專屬保存溶劑:出廠保存溶劑為水 / 甲醇(95:5 v/v),使用后需先用純水沖洗 1 小時去除高氯酸等酸性流動相,再換用該體系保存 —— 甲醇比例僅 5%,既能防微生物,又不破壞冠醚固定相。
關鍵禁忌:絕對禁止用含鉀鹽的溶劑保存(K?會競爭性結合冠醚環(huán),導致手性選擇能力喪失);也不可用純甲醇或高比例有機相,會導致涂敷型固定相脫落。
應急處理:若短期無專用保存溶劑,可用純水臨時保存(<3 天),但需每日更換,防止細菌滋生。
四、共性保存要點
過濾與脫氣:所有保存溶劑需經(jīng) 0.22μm 濾膜過濾、超聲脫氣,避免顆粒與氣泡損傷柱床;
堵頭保護:取下色譜柱后,立即用專用堵頭密封兩端,防止空氣進入與溶劑揮發(fā);
定期檢查:每月需用保存溶劑沖洗 1 次,尤其潮濕環(huán)境,避免溶劑分層或變質(zhì)。
通過針對 IC、AGP、CR (+) 手性柱的固定相特性選擇專屬保存溶劑,可有效維持其手性選擇性與柱效,為后續(xù)實驗的精準拆分提供保障。
廣州綠百草作為 Daicel 大賽璐授權代理商,提供色譜柱選型、方法開發(fā)等技術支持,助力客戶高效實現(xiàn)手性分離與分析。
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